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人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人Ⅰ型胶原C端肽ELISA试剂盒 Human C-telopeptide of typeⅠcollagen, CTX-ⅠElisa Kit 产品介绍
人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。通过包被特异性抗体于酶标板,待测样本中的Col Ⅰ抗原与包被抗体结合,洗涤去除未结合成分后,依次加入生物素化检测抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,形成复合物。加入显色底物(TMB)后,在HRP催化下显蓝色,终止反应后转为黄色。通过酶标仪测定450 nm波长处的吸光度(OD值),Col Ⅰ浓度与OD值呈正相关,标准曲线计算样本浓度。 样本要求
血清:无菌无热原采血管收集全血,静置30分钟后3000 rpm离心10分钟分离血清。 血浆:EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝,3000 rpm离心30分钟取上清。 细胞上清液:离心去除颗粒物(3000 rpm,10分钟)。 组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清(3000 rpm,10分钟)。 保存:分装后-20℃冻存,避免反复冻融;检测前室温解冻并混匀。 试剂盒组成
预包被酶标板 Col Ⅰ标准品(浓度梯度) 生物素化抗体 HRP标记亲和素 TMB显色液 终止液 洗涤缓冲液(浓缩液,需稀释) 操作步骤
标准品与样本加样:每孔加入标准品或样本100 μL,37℃孵育1小时。 洗涤:弃液后加入洗涤液,静置30秒后弃去,重复3次。 加检测抗体:每孔加入生物素化抗体100 μL,37℃孵育1小时,洗涤。 加酶结合物:加入HRP标记亲和素100 μL,37℃孵育30分钟,洗涤。 显色:加入TMB底物100 μL,避光反应15分钟。 终止与检测:加入终止液50 μL,立即测定450 nm OD值。 注意事项
试剂盒保存于2-8℃,有效期6个月;开封后请尽快使用。 避免底物接触强光或金属离子;终止液含酸性物质,需防护操作。 样本溶血或脂血可能干扰结果,建议重复测定。 技术参数 检测范围:0.5-200 ng/mL(具体以标准曲线为准)。 灵敏度:<0.1 ng/mL。 批内/批间变异系数:<10%。 应用范围 适用于人血清、血浆、细胞培养上清及组织匀浆中Col Ⅰ的定量检测,广泛应用于纤维化研究、骨代谢及创伤修复等领域。
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上海谷研实业有限公司
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