产品概述

该试剂盒主要用于科学研究或临床体外诊断，定量或定性测定人血清、血浆或其他相关液体样本中EB病毒IgA抗体的含量。

核心原理：双抗体夹心法 / 竞争法

双抗体夹心法：通常用于检测抗原，但在部分抗体检测试剂盒中，原理是利用微孔板上包被的EB病毒特异性抗原（如VCA抗原），捕获样本中的EB病毒IgA抗体，再加入酶标二抗进行显色。

竞争法：部分EB病毒抗体检测试剂盒采用竞争法原理。即样本中的抗体与参照标准品竞争结合有限的抗原位点。

试剂盒组成

酶标包被板 48T / 96T (可拆卸) 2-8℃保存

标准品 6-7管 (不同浓度梯度) 2-8℃保存

酶标试剂 (HRP标记抗体) 6ml - 10ml 2-8℃保存

样品稀释液 6ml 2-8℃保存

浓缩洗涤液 20ml (20×或30×) 2-8℃保存

显色剂 A & B 各6ml 2-8℃，避光

终止液 6ml (2M H₂SO₄) 2-8℃保存

封板膜 2张 室温

样本处理与保存

血清：

使用无热原、无内毒素的试管采集血液。

室温放置1-2小时或4℃过夜，使血块收缩。

3000rpm/min 离心20分钟，小心收集上清液。

血浆：

可使用EDTA、肝素钠或枸缘酸钠抗凝。

采集后立即混匀，室温放置20分钟。

3000rpm/min 离心20分钟，收集上清。

注意事项：

避免溶血：溶血标本会增加非特异性显色。

保存：样本若不立即使用，应分装后于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融，否则会导致抗体效价下降。

脂血/黄疸：中度脂浊、轻度溶血、中度黄疸通常不影响检测，但严重时需稀释或重新采样。

操作步骤

平衡：将试剂盒从冰箱取出，平衡至室温（18-25℃），约需15-30分钟。

配液：将浓缩洗涤液按比例（如1:20或1:30）用蒸馏水稀释。

加样：

设定标准品孔（加入不同浓度标准品）和样本孔。

每孔加入50μl标准品或待测样本。

立即加入50μl生物素标记抗体（或酶标试剂）。

温育：37℃温育30-60分钟（具体时间视说明书而定）。

洗涤：弃去孔内液体，每孔注满洗涤液，静置30秒后弃去，重复5次，拍干。

显色：每孔加入显色剂A、B各50μl，37℃避光显色10-15分钟。

终止：每孔加入50μl终止液，轻轻震荡混匀。

读数：在450nm波长处测定吸光度（OD值）。

注意事项

洗涤液结晶：浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出，这属于正常现象。使用前需在37℃水浴中加温助溶，充分混匀后再进行稀释。

避光：显色剂B（TMB）对光敏感，显色过程必须避光进行，否则背景会升高。

终止液：加入终止液后，溶液颜色应由蓝变黄。若颜色异常，需检查终止液是否失效。

加样时间：一次加样时间**控制在5分钟内，如样本量大，建议使用多通道加样器。

复孔：为了减少实验误差，建议标准品和样本都做复孔（双复孔）。

安全：底物TMB有致癌风险，终止液为强酸，操作时请佩戴手套和口罩，避免直接接触皮肤或吸入蒸气。

结果判定

定性：通常根据S/CO值（样本OD值/临界值OD值）判断。S/CO ≥ 1.0 为阳性，< 1.0 为阴性（具体阈值以说明书为准）。

定量：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，计算样本浓度。

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