检测原理

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗大鼠Hcy抗体的微孔酶标板中，依次加入校准品、待测样本及HRP标记的Hcy抗原（酶标抗原），经温育与洗涤后，形成固相抗体-酶标抗原复合物。加入底物（TMB）后，在HRP催化下产生蓝色产物，终止反应后转化为黄色，于450 nm波长测定吸光度（OD值）。OD值与样本中Hcy浓度呈负相关，通过标准曲线计算浓度。

适用范围

定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中的Hcy浓度。

主要组分

预包被抗大鼠Hcy抗体的微孔板

Hcy校准品（浓度梯度）

HRP标记的Hcy抗原

底物A（TMB）与底物B

终止液（2M硫酸）

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

样本要求

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液

体积：50–100 μL/检测

保存：2–8℃短期保存（≤24小时），-20℃长期保存（避免反复冻融）

操作步骤

试剂准备：洗涤缓冲液按比例稀释，校准品复溶。

加样：分别加入校准品、待测样本及酶标抗原至对应孔位。

温育：37℃孵育60分钟，洗涤5次。

显色：加入底物A/B，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液，30分钟内测定450 nm OD值。

结果计算

以校准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标，拟合标准曲线（四参数或对数方程），计算样本浓度。

性能参数

灵敏度：≤0.1 nmol/L

检测范围：0.5–100 nmol/L

精密度：批内CV <10%，批间CV <15%

特异性：不与大鼠其他氨基酸交叉反应

注意事项

实验前需平衡所有组分至室温（20–25℃）。

避免底物接触金属或氧化剂，终止后颜色稳定时间≤30分钟。

高值样本需稀释后复测，确保结果在标准曲线线性范围内。

储存与有效期

未开封：2–8℃保存，有效期6个月；-20℃保存，有效期12个月。

开封后：微孔板需密封防潮，酶标抗原及底物避光保存。

公司正在出售的产品