产品概述

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测大鼠样本（如血清、血浆、组织匀浆等）中的透明质酸（Hyaluronic Acid, HA）含量。透明质酸是一种酸性粘多糖，在关节润滑、创伤修复及血管通透性调节中起重要作用。本试剂盒具有高灵敏度和特异性，适用于科研及临床研究。

产品参数

检测范围：15.6–1000 pg/mL

灵敏度：≤5 pg/mL

样本类型：血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆

保存条件：未开封试剂盒2-8℃保存；开封后按组分要求保存（如标准品需-20℃避光）。

实验原理

采用双抗体夹心法：

预包被抗大鼠HA抗体捕获样本中的HA。

加入生物素标记的检测抗体形成复合物。

通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素与底物反应，产生颜色信号，其吸光度（OD值）与HA浓度正相关。

操作步骤

试剂准备：

标准品：用稀释液复溶后梯度稀释（如2000 pg/mL起始，倍比稀释至7个浓度）。

洗涤液：30倍稀释浓洗涤液（20 mL浓缩液+580 mL蒸馏水）。

加样与孵育：

每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗板5次后加入检测抗体，37℃孵育60分钟。

信号检测：

加入TMB底物避光显色15-30分钟（显色时间需优化），终止反应后450 nm测OD值。

注意事项

样本处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物。

反应控制：建议每板设置空白孔、阴性对照及复孔。

安全提示：避免接触终止液（强酸）及底物（含刺激性成分），操作时佩戴防护用具。

数据计算

以标准品OD值绘制标准曲线（四参数拟合），根据样本OD值计算HA浓度。

常见问题

高背景：可能因洗涤不充分或样本溶血导致，需优化洗涤次数及样本预处理。

显色过深：提前终止反应并缩短显色时间。

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