大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，用于定量检测大鼠血清或血浆中的肌钙蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）浓度。通过特异性抗体结合、酶催化显色反应及吸光度测定，实现高灵敏度和高特异性的检测。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠Tn-Ⅰ捕获抗体。

样本反应：加入待测样本或标准品，Tn-Ⅰ与捕获抗体结合。

检测抗体：加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：洗涤后加入TMB底物，在HRP催化下显色，颜色深度与Tn-Ⅰ浓度正相关。

终止与测定：加入终止液（如硫酸）后，于450nm波长测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

（以96孔配置为例）

预包被微孔板（96T）

Tn-Ⅰ标准品（浓度梯度：通常含80ng/ml起始浓度，需按说明书稀释）

HRP标记检测抗体

TMB显色底物、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

空白对照

封板膜

样本要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），取上清保存。

操作步骤

加样：每孔加入标准品或样本50μL，37℃孵育30分钟。

洗涤：弃液后拍干，加洗涤液洗板5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体50μL，37℃孵育30分钟，重复洗涤。

显色：加入TMB底物50μL，避光反应15分钟。

终止与读数：加终止液50μL，立即于450nm测OD值。

注意事项

试剂盒需2-8℃保存，使用前平衡至室温。

避免交叉污染，不同标准品或样本需更换吸头。

显色时间需严格控制，终止后10分钟内完成读数。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过样本OD值计算浓度。

技术参数

检测范围：通常为1.25-80ng/ml（具体以实际标准品梯度为准）。

灵敏度：≤0.1ng/ml。

批内/批间变异系数：＜10%。

适用范围

适用于心血管疾病研究、心肌损伤评估等领域的实验检测。
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