大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒

产品基本信息

检测原理：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

适应物种：大鼠

检测样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清

规格：48T/96T

储存条件：2-8℃避光保存

用途：科研实验专用

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法：

特异性抗体预包被于酶标板，样本中的MMP-5与包被抗体结合。

依次加入生物素化检测抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，形成抗体-抗原-抗体复合物。

洗涤后加入显色底物TMB，在HRP催化下显蓝色，终止后变为黄色。

通过酶标仪测定450 nm波长处的吸光度（OD值），标准曲线计算样本浓度。

操作步骤

试剂准备

平衡：所有组分使用前需室温平衡20-30分钟。

标准品：按说明书梯度稀释（通常为0-500 pg/mL）。

加样与孵育

标准品孔：加入50μL不同浓度标准品。

样本孔：加入10μL待测样本+40μL稀释液（或直接加50μL，依说明书调整）。

空白孔：仅加样本稀释液。

每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤

弃液后拍干，每孔加满洗涤液（PBS+0.05% Tween-20），重复洗板5次。

显色与终止

加底物A/B各50μL，避光孵育15分钟。

加入终止液50μL，颜色由蓝变黄。

检测

15分钟内于450nm读取OD值（校正波长630nm）。

数据分析

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

样本浓度通过曲线方程计算，复孔CV值应＜10%。

操作注意事项

试剂平衡：从4℃取出后需室温平衡15-30分钟再使用；未用完板条应密封保存。

洗涤液处理：浓洗涤液若有结晶，可37℃水浴助溶，不影响检测效果。

加样规范：使用校准后的加样器，建议单次加样时间不超过5分钟；样本过多时可使用排枪。

标准曲线：每次检测需同步制作标准曲线，建议复孔检测。若样本OD值超出标准曲线范围，需用稀释液稀释后重新测定，最终浓度乘以稀释倍数。

避免污染：封板膜仅限单次使用；不同批号组分不可混用。

底物保存：需避光保存。

结果判定：严格按说明书操作，以酶标仪读数为准。

废弃物处理：所有实验废弃物需按生物危害物规范处置。
公司正在出售的产品