预期用途

用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等样本中尿激酶（UK）的含量。

检测方法：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

主要参数

检测范围：标准曲线覆盖1.56–100 ng/mL（具体范围以实际标准品为准）。

灵敏度：最低检测限≤0.5 ng/mL。

特异性：不与大鼠其他纤溶酶原激活物（如t-PA）发生交叉反应。

有效期：6个月（未开封试剂盒，2-8℃保存）。

样本类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、组织匀浆、细胞培养上清。

实验原理

采用双抗体夹心ELISA法：

微孔板预包被抗大鼠UK单克隆抗体。

加入样本或标准品后，UK与包被抗体结合。

依次加入生物素化检测抗体、HRP标记链霉亲和素，形成“抗体-抗原-抗体-酶”复合物。

TMB显色，终止后测定450 nm吸光度（OD值），浓度与OD值呈正相关。

样本处理要求

采集与保存：

避免溶血或反复冻融。

短期（1周内）检测可4℃保存；长期需分装后-20℃或-80℃冻存。

注意事项：

含NaN3的样本需透析处理（NaN3抑制HRP活性）。

组织样本需匀浆后离心取上清。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（冻干粉，需复溶）

生物素化抗体、HRP标记物

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

TMB显色液、终止液

封板膜、说明书

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：洗板5次，拍干。

显色与终止：加入TMB显色15分钟，终止后30分钟内读数。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，拟合四参数或对数曲线。

样本浓度需乘以稀释倍数（若预处理时稀释）。

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融。

洗涤需彻底，防止非特异性结合。

不同批次试剂不可混用。

本试剂盒仅供科研使用，不适用于临床诊断。

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