大鼠雌激素受体(ER)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗大鼠ER抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，通过TMB底物显色（蓝色→黄色）。颜色深度与样本中ER浓度呈正相关，于450nm波长测定OD值并计算浓度。

样本要求

血清：无热原/内毒素试管采集，避免细胞刺激，3000rpm离心10分钟分离血清。

血浆：EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝，3000rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：3000rpm离心10分钟去除颗粒物。

组织匀浆：生理盐水匀浆后3000rpm离心10分钟取上清。

试剂盒组成

预包被微孔板（48T/96T，2-8℃保存）

ER标准品（0.5mL/瓶，2-8℃保存）

HRP标记抗体、TMB显色液（A/B液）、终止液

封板膜、密封袋

说明书

操作步骤

显色液配制：A液与B液等体积混合（或按说明书比例），避光保存。

加样：每孔加入样本/标准品100μL，HRP抗体50μL，37℃温育60分钟。

洗涤：弃液后注满洗涤液，静置30秒甩干，重复5次。

显色：每孔加TMB工作液100-150μL，室温避光反应15分钟。

终止：加入50μL终止液，立即于450nm测OD值。

注意事项

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

试剂组分需平衡至室温后使用，避免反复冻融。

显色时间需根据标准曲线调整，超时可能导致读数偏差。
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