产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测大鼠血清、血浆或其他生物样本中的白介素3（IL-3）浓度。其原理基于预包被抗体的微孔板捕获目标蛋白，通过HRP标记抗体和底物显色反应实现检测，颜色深浅与IL-3浓度呈正相关。

试剂盒组成

预包被IL-3抗体的96孔微孔板

标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

底物TMB溶液（A/B液）

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

封板膜

样本处理要求

血清：全血室温静置10-20分钟凝固后，2000-3000×g离心20分钟，收集上清；若保存中产生沉淀，需再次离心。

血浆：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），避免反复冻融。

其他体液（如尿液、胸腹水）：参照血浆处理方法，离心后取上清检测。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释，现配现用，剩余标准品不可保存。

加样：依次加入样本、标准品、HRP标记抗体至微孔，避免交叉污染。

温育：37℃避光孵育指定时间，确保各孔反应时间一致。

洗涤：彻底拍干孔内液体，避免残留。

显色：加入TMB底物，避光反应后终止，立即读取450nm处OD值。

性能参数

准确性：标准曲线相关系数R²≥0.990。

灵敏度：最低检测浓度＜1.0 pg/mL（具体参考批次说明书）。

特异性：不与大鼠其他细胞因子交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数＜15%。

注意事项

试剂需2-8℃避光保存，使用前平衡至室温。

不同批号组分不可混用，避免反复冻融样本。

底物B对光敏感，TMB有毒性，操作时需防护。

实验结束后需立即测定OD值，避免显色过度。

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