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大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 大鼠白血病抑制因子ELISA试剂盒 Rat leukemia inhibitory factor, LIF Elisa Kit 产品介绍
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 试剂盒参数 规格:96T/48T(微孔板配置) 保存条件:2-8℃避光保存 保质期:6个月(以实际批次标签为准) 适用样本:大鼠血清、血浆、细胞培养上清液等 检测原理
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被抗大鼠LIF抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经温育和洗涤后,加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下呈蓝色,酸化后转为黄色,其吸光度(OD值)与样本中LIF浓度正相关。通过标准曲线计算目标浓度。 试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔(2-8℃保存) 标准品:冻干粉或液体(浓度范围示例:0-2000 pg/mL) 标准品稀释液:1.5 mL ×1瓶 酶标试剂:HRP标记抗体(3 mL/6 mL) 样品稀释液:3 mL/6 mL 显色剂A/B液:各3 mL/6 mL 终止液:1×10 mL 洗涤缓冲液(20×浓缩):需按比例稀释 封板膜、说明书、密封袋 样本处理 血清:全血静置30分钟后离心(3000 rpm,10分钟),避免溶血。 血浆:EDTA/肝素抗凝,离心(3000 rpm,30分钟)取上清。 细胞上清:离心(3000 rpm,10分钟)去除颗粒物。 注:样本需分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。 操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释至目标浓度。 加样:每孔加入样本或标准品50 μL,随后加入酶标试剂50 μL(空白孔除外)。 温育:37℃孵育60分钟,洗板5次。 显色:每孔加显色剂A/B各50 μL,避光反应15分钟。 终止:加入终止液50 μL,15分钟内测定OD450 nm。 结果计算 以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线(推荐四参数拟合)。 样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数(若适用)。 注意事项
试剂盒仅限科研使用,不可用于临床诊断。 避免交叉污染,不同批次试剂不可混用。 若样本浓度超出标准曲线范围,需调整稀释比例重新检测。 实验环境需符合生物安全要求,废弃物按规范处理。
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上海谷研实业有限公司
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