产品用途

本试剂盒用于定量检测小鼠血清、血浆或细胞上清液中的凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）含量，适用于科学研究，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗小鼠TAT抗体预包被于微孔板中，加入待测样本及标准品后，TAT与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成复合物。洗涤后加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与样本中TAT浓度呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

样本处理

血清：采集血液至无热原/内毒素试管，避免溶血，3000 rpm离心10分钟分离血清。

血浆：使用EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟取上清。

细胞上清：3000 rpm离心10分钟去除颗粒物。

样本需分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

操作步骤

将试剂平衡至室温（20-25℃）。

分别加入标准品、待测样本至对应微孔，每孔100 μL。

加入HRP标记检测抗体，37℃孵育60分钟。

洗涤5次，拍干。

每孔加入TMB底物100 μL，避光反应15分钟。

加入终止液50 μL，30分钟内测定OD值。

注意事项

不同批次试剂不可混用。

避免底物接触金属或氧化剂。

实验需使用一次性吸头，避免交叉污染。

技术参数

检测范围：通常为1.56-100 ng/mL（具体以标准曲线为准）。

灵敏度：≤0.5 ng/mL。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。

储存条件

未开封试剂盒保存于2-8℃，有效期12个月；开封后微孔板需密封防潮。

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