大鼠白介素16(IL-16)ELISA试剂盒

检测原理

双抗体夹心法：

包被抗体：纯化的大鼠目标因子抗体预先包被在微孔板上。

样本/标准品加入：样本中的目标因子与包被抗体结合。

酶标抗体：加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

显色反应：洗涤后加入底物TMB。在HRP催化下，TMB显蓝色，加酸终止反应后变黄色。

定量：颜色深浅与样本中目标因子浓度成正比。450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算浓度。

用途

用于定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中目标因子(如IL-1α)的含量。

试剂盒组成

预包被微孔板 (48孔或96孔配置)

标准品 (浓度范围随产品而定，需冻干/液体)

样品稀释液

检测抗体(酶标抗体)

底物溶液 (TMB A液、B液)

终止液 (稀硫酸等酸液)

浓缩洗涤液 (需稀释使用)

封板膜/说明书。

样本要求

类型：血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆液等。

处理：避免反复冻融。血浆样本应使用EDTA或肝素抗凝，高速离心去除颗粒。

操作步骤

标准品梯度稀释。

加样：标准品和样本加入对应孔中，37℃温育。

洗涤：弃去孔内液体，用稀释好的洗涤液洗板数次。

加酶标抗体：每孔加入酶标工作液，37℃温育。

洗涤：同步骤3。

显色：加入底物(TMB A+B)，避光反应。

终止：加入终止液。

读数：30分钟内于450nm测定各孔OD值。

结果计算

绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标(X)，相应OD值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。

计算浓度：根据样本OD值，在标准曲线上查找对应的浓度。需注意乘以样本稀释倍数。

注意事项

仅供研究使用，不用于诊断或治疗。

严格按照说明书操作。

不同批号试剂组份不得混用。

终止液有腐蚀性，避免接触皮肤。

废弃液体应妥善处理。
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