大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒

检测样本类型：适用于血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞培养上清及组织匀浆等体液样本。

检测波长：450 nm（需配备酶标仪）。

试剂盒组成

| 组分名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存条件 |

| 微孔酶标板 | 8孔×12条 | 12孔×4条 | 2-8℃干燥 |

| 标准品（50 ng/mL）| 0.6 mL | 0.6 mL | 2-8℃（使用前稀释） |

| 标准品稀释液 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |

| 检测抗体-HRP | 10 mL | 5 mL | 2-8℃避光 |

| 20×洗涤缓冲液 | 25 mL | 15 mL | 室温溶解后使用 |

| 底物A/B | 各6 mL | 各3 mL | 2-8℃避光 |

| 终止液 | 6 mL | 3 mL | 2-8℃ |

| 封板膜、说明书等 | 按规格配套提供 | | |

实验前准备

自备器材：

酶标仪（450 nm滤光片）、微量移液器（0.5-1000 μL范围）及枪头。

37℃恒温箱、蒸馏水或去离子水。

试剂处理：

使用前将所有组分室温平衡20分钟，洗涤液若出现结晶需37℃水浴溶解。

样本建议离心去除颗粒物，避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至目标浓度（如0、5、10、20、40、80 ng/mL）。

加样与温育：

分别加入标准品或样本（10 μL/孔）及检测抗体（50 μL/孔），37℃孵育60分钟。

洗涤5次（每孔300 μL洗涤液，静置30秒后弃去）。

显色与终止：

加入底物A/B各50 μL，37℃避光反应15分钟（需定时观察显色强度）。

终止液50 μL/孔，立即测定OD值（450 nm）。

注意事项

储存：未开封试剂盒2-8℃保存，开封后板条需密封防潮。

质量控制：建议每批次实验设置复孔，标准曲线R²≥0.99。

反应控制：显色过深需提前终止，避免读数超出线性范围。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，通过样本OD值反算β-OHB浓度（ng/mL）。

技术参数

检测范围：1.5-80 ng/mL（具体以实际标曲为准）。

灵敏度：≤0.5 ng/mL。

批内/批间差：CV＜10%。
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