大鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒

产品简介

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-13浓度。具有高灵敏度、高特异性和良好的批间重复性。

检测原理

包被：微孔板预包被抗大鼠IL-13单克隆抗体。

结合：样本中的IL-13与包被抗体结合。

检测：加入生物素标记的二抗与IL-13结合，形成免疫复合物。

显色：加入HRP标记的链霉亲和素及TMB底物，显色强度与IL-13浓度成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 数量（96T） | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1块 | 2-8℃ |

| 标准品（1000 pg/mL）| 2支 | -20℃ |

| 生物素标记抗体 | 1瓶（120 μL）| 2-8℃ |

| HRP-链霉亲和素 | 1瓶（120 μL）| 2-8℃（避光）|

| TMB显色液 | 1瓶（10 mL） | 2-8℃（避光）|

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶（10 mL） | 室温 |

样本要求

血清/血浆：建议EDTA抗凝，离心去除颗粒，-20℃保存，避免反复冻融。

细胞上清：离心去除沉淀，立即检测或-80℃保存。

操作步骤

标准品稀释：用标准品稀释液配制0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL梯度。

加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗涤：甩干液体，用洗涤液洗板3次。

加检测抗体：每孔加入100 μL生物素标记抗体，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：每孔加入100 μL HRP-链霉亲和素，37℃避光孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止：加入50 μL终止液，450 nm波长测OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

通过曲线方程计算样本浓度（pg/mL）。

性能参数

检测范围：15.6-1000 pg/mL

灵敏度：<5 pg/mL

回收率：85%-115%

批内变异：<8%，批间变异：<10%

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融。

TMB显色时间需严格控制，避免强光照射。

不同批次试剂不可混用。
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