人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附试验 (Sandwich ELISA) 原理，用于定量检测人血清、血浆（肝素、EDTA、柠檬酸盐抗凝）、细胞培养上清液或其他生物体液样本中天然及重组的人骨形态发生蛋白2 (BMP-2) 的浓度。

检测原理

包被： 预包被在微孔板孔壁上的特异性抗人BMP-2抗体（捕获抗体）捕获样本中的人BMP-2蛋白。

洗涤： 洗去未结合的物质。

结合： 加入生物素标记的特异性抗人BMP-2检测抗体，与捕获的人BMP-2结合，形成抗体-抗原-抗体复合物。

洗涤： 再次洗去未结合的检测抗体。

信号放大： 加入辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)。链霉亲和素与生物素特异性结合。

洗涤： 洗去未结合的Streptavidin-HRP。

显色： 加入底物（通常是TMB - 3,3',5,5'-四甲基联苯胺）。在HRP催化下，无色的TMB被氧化成蓝色产物。

终止与读数： 加入终止液（通常是酸性溶液）使反应停止，颜色由蓝色变为黄色。在特定波长（通常为450nm，参考波长可为540nm或570nm）下使用酶标仪测定吸光度值（OD值）。

定量： 样品中的BMP-2浓度与产生的颜色强度（OD值）成正比，通过绘制标准曲线，可以计算出样品中BMP-2的精确浓度。

自备材料

精准移液器（单通道、多通道）及匹配的吸头

去离子水或蒸馏水（用于稀释洗涤液）

容量瓶/大量程容器（用于稀释洗涤液）

酶标仪 (450nm +/- 参考波长检测能力)

漩涡混合器 (Vortex mixer)

湿盒或密封袋/盒子（可选，用于37°C孵育时防止蒸发）

计时器

吸水纸或纸巾（甩干酶标板用）

标准品/样品稀释用无菌离心管

样本要求与准备

样本类型： 人血清、血浆（EDTA, 肝素, 柠檬酸盐抗凝）、细胞培养上清液、其他生物体液。

储存： 收到样本后应尽快检测。如需保存，请将样本分装并在 -20°C或-80°C 冷冻。避免反复冻融（通常<3次）。

样本处理：

血清/血浆： 采集后室温静置30分钟，4°C 2000-3000×g离心10-20分钟，小心收集上清（勿触及沉淀）。如有溶血、脂血或污染，需特殊处理或弃用（参考说明书）。

细胞培养上清： 收集上清后立即离心（1000×g， 5分钟）去除颗粒物，取上清检测。

其他体液： 处理方法需根据样本性质和预期目标浓度调整（可能需要稀释），参考说明书。

样本稀释： 大多数情况下，样本需要用样品/标准品稀释液进行适当稀释以达到标准曲线范围内。稀释比例需预实验确定。重要！

储存条件

未开封试剂盒： 所有组分应保存在 2-8°C （冰箱冷藏室），并在包装盒标注的有效期内使用。

开封/复溶后：

标准品：通常稀释后应立即使用，或者分装后在-20°C或更低温度冷冻保存（具体时间及稳定性请参考说明书）。

检测抗体、酶结合物：根据说明书要求保存（常为2-8°C）。

稀释的洗涤液（工作液）：室温或2-8°C，通常一周内稳定。

预包被板：未使用时放回带有干燥剂的铝箔袋密封，2-8°C保存。

显色底物 (TMB)：通常对光敏感，避光保存于2-8°C（颜色变蓝则失效）。

终止液：室温或2-8°C保存。
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