人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒

检测原理

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。预先包被抗BMP-4抗体的微孔板中，依次加入样本、生物素标记的检测抗体及HRP标记链霉亲和素，经温育洗涤后，通过TMB底物显色。颜色的深浅与样本中BMP-4浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值并计算浓度。

样本要求

血清：无菌采血后3000rpm离心10分钟分离血清，避免溶血或反复冻融。

血浆：建议使用EDTA/肝素抗凝，3000rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：离心去除沉淀后分装保存。

组织匀浆：生理盐水匀浆后离心取上清。

注：样本需分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

试剂盒组成

（以96T为例）

| 组分 | 规格 | 保存条件 |

| 预包被抗BMP-4微孔板 | 12条×8孔 | 2-8℃（干燥） |

| BMP-4标准品 | 冻干粉×12瓶 | -20℃（复溶后2-8℃） |

| 生物素标记检测抗体 | 1瓶 | 2-8℃ |

| HRP标记链霉亲和素 | 1瓶 | 2-8℃ |

| TMB显色液 | 1瓶 | 避光保存 |

操作步骤

标准品复溶：按说明书用标准品稀释液配制系列浓度。

加样：依次加入标准品/样本、检测抗体、HRP标记物，每步孵育后充分洗涤。

显色：加入TMB避光反应，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

实验前需平衡所有试剂至室温（20-25℃）。

不同批号组分不可混用，避免交叉污染。

结果判读需结合标准曲线，超出检测范围需稀释后重测。

技术参数

检测范围：15.6-1000 pg/mL（具体以实际试剂盒为准）。

灵敏度：≤5 pg/mL。

精密度：板内/板间变异系数均<10%。
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