人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于体外定量检测人血清、血浆或其他生物液体中的β-乳球蛋白（β-Lg）含量。适用于科研及临床实验室使用。

实验原理

固相包被：微孔板预包被高纯度的抗β-Lg抗体，形成固相载体。

反应体系：依次加入待测样本、生物素化抗β-Lg抗体及HRP标记的亲和素，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色检测：经TMB底物显色后，在450 nm波长下测定吸光度（OD值），样本浓度与OD值呈正相关。

试剂盒组成

酶联板：96孔（可拆卸或预包被）。

标准品（冻干粉）：2瓶（10 ng/ml，需用稀释液复溶后梯度稀释）。

生物素化抗体、HRP-亲和素复合物、TMB显色液、终止液等。

洗涤缓冲液（20×浓缩液，需稀释后使用）。

操作步骤

样本准备：血清/血浆需离心去除颗粒物，避免反复冻融。

标准品稀释：按说明书梯度稀释（10 ng/ml至0.156 ng/ml），需临用前配制。

加样与温育：

每孔加入50 μl标准品或样本，37℃孵育40分钟。

洗涤后加入生物素化抗体（100 μl/孔），37℃孵育30分钟。

酶结合与显色：

加入HRP-亲和素工作液（100 μl/孔），37℃孵育20分钟。

加入TMB显色液（100 μl/孔），避光反应10-20分钟（显色时间需优化）。

终止与检测：加入终止液后30分钟内测定OD值（450 nm）。

注意事项

质量控制：建议设置复孔及空白对照（仅加稀释液）。

温育条件：避免蒸发，建议使用湿盒或封板膜覆盖。

洗涤步骤：需彻底洗涤4-6次，拍干残留液体。

试剂稳定性：未开封试剂需按标签要求保存（通常2-8℃），复溶后标准品避免反复冻融。

技术参数

检测范围：0.156-10 ng/ml（灵敏度≤0.078 ng/ml）。

精密度：板内变异系数（CV）<10%，板间CV<15%。

有效期：6个月（具体见包装标签）。
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