预期用途

本试剂盒适用于体外定量检测人血清、血浆（EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝）或细胞培养上清液样本中的可溶性T细胞受体 (TCR) 蛋白含量。

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA) 原理进行检测：

包被抗体： 微孔板孔预先包被有高亲和力的小鼠抗人TCR单克隆抗体（识别公共表位或特定链）。

加样与结合： 将待测样本或标准品加入孔中，样本中存在的可溶性TCR与包被抗体特异性结合。

加检测抗体： 加入生物素标记的小鼠抗人TCR单克隆抗体（识别另一个表位或链），该抗体与已结合的TCR形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

加酶结合物： 加入辣根过氧化物酶 (HRP) 标记的链霉亲和素 (Streptavidin-HRP)。链霉亲和素与检测抗体上的生物素特异性结合。

加显色底物： 加入TMB (3,3',5,5'-四甲基联苯胺) 底物溶液。HRP催化TMB发生显色反应。

终止反应与读数： 加入终止液终止反应，溶液颜色由蓝变黄。使用酶标仪在450nm波长（参考波长570nm或630nm）下测量每孔的吸光度 (OD值)。

定量分析： 样本中的TCR浓度与所测得的OD值成正比。通过标准曲线即可计算出样本中的TCR浓度。

试剂盒组分

| 组分名称 | 规格 | 数量 | 状态/储存条件 |

| 预包被微孔板 | 8孔 x 12条 | 1块 | 2-8°C, 干燥密封 |

| TCR检测抗体（生物素标记） | 120 μL | 1瓶 | -20°C, 避光保存 |

| 检测抗体稀释液 | 10 mL | 1瓶 | 2-8°C |

| HRP-链霉亲和素（SABC） | 120 μL | 1瓶 | -20°C, 避光保存 |

| SABC稀释液 | 10 mL | 1瓶 | 2-8°C |

| 人TCR标准品冻干粉 | [例如：10 ng] | 2支 | -20°C |

| 标准品稀释液 | 1 mL | 1瓶 | 2-8°C |

| 样本稀释液 | 20 mL | 1瓶 | 2-8°C |

| 浓缩洗涤液 (20X) | 30 mL | 1瓶 | RT (稀释后2-8°C) |

| 显色底物TMB溶液 | 10 mL | 1瓶 | 2-8°C, 避光保存 |

| 终止液 | 10 mL | 1瓶 | RT |

| 封板膜 | | 4张 | RT |

| 产品说明书 | | 1份 | RT |

注1： 标准品冻干粉需用标准品稀释液复溶后使用（复溶方法见说明书或试剂瓶标签）。

注2： 浓缩洗涤液(20X) 临用前需用去离子水或蒸馏水按1:20稀释成工作洗涤液(1X)。

注3： 检测抗体原液、HRP-链霉亲和素原液需根据要求用相应稀释液稀释后方可使用。

注4： RT: 室温 (15-25°C)。避免阳光直射和过热。

样本类型与处理

血清： 采血后室温凝固30分钟，随后4°C, 1000-2000×g离心20分钟，收集上清。分装保存于-80°C，避免反复冻融。

血浆： 使用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂。采血后30分钟内于2-8°C, 1000-2000×g离心20分钟，收集上清。分装保存于-80°C，避免反复冻融。

细胞培养上清： 细胞培养物于2-8°C, 1000×g离心20分钟，收集上清。即刻检测或分装保存于-80°C，避免反复冻融。

其他体液： 如唾液、脑脊液等，处理方法需具体优化，可能有基质干扰，建议预实验验证稀释度。

样本应避免溶血、高脂血、反复冻融。

稀释： 样本浓度可能在检测范围之外，初次实验建议预实验，选择合适稀释度（如1:2, 1:5）在样本稀释液中稀释。最终计算浓度时需乘以稀释倍数。

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