大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用竞争性酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠样本中的血栓素B2（TXB2）。预先包被TXB2抗原的微孔板与样本或标准品中的TXB2竞争结合生物素标记的抗体，通过辣根过氧化物酶（HRP）-链霉亲和素系统催化TMB显色，450 nm波长下测定吸光度（OD值）。待测物浓度与OD值呈负相关，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔（8×12），包被TXB2抗原，4℃保存。

标准品：冻干粉2支，需按说明书复溶，梯度稀释后用于标准曲线绘制。

生物素标记抗体：浓缩液120 μL，使用前需稀释。

HRP-链霉亲和素（SABC）：浓缩液120 μL，避光保存。

TMB显色底物：避光保存，显色反应终止后呈黄色。

终止液：酸性溶液，用于终止显色反应。

洗涤缓冲液（25×）：需稀释后使用。

样本要求

适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等。

样本处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物，-20℃长期保存。

检测步骤

加样：标准品/样本与生物素抗体加入微孔，37℃孵育1小时。

洗涤：洗板5次，去除未结合物。

酶结合：加入HRP-链霉亲和素，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟，终止后测定OD450。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线（四参数拟合），样本浓度通过曲线方程计算。

性能参数

检测范围：7.813~500 pg/mL（具体以实际标准曲线为准）。

灵敏度：≤4.688 pg/mL。

精密度：板内/板间变异系数（CV）<10%。

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融。

严格控制反应时间和温度，显色后及时终止。

不同批次试剂不可混用。

保存与有效期

未开封试剂盒2-8℃保存6个月，开封后按组分要求存放（部分需-20℃避光）。

适用领域

科研用途，不用于临床诊断。
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