预期用途

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆或其他体液样本中的Chemerin蛋白浓度，适用于科研用途。

实验原理

固相抗体包被：微孔板预包被高纯度抗人Chemerin捕获抗体。

抗原-抗体结合：样本中的Chemerin与固相抗体结合后，加入生物素化检测抗体形成复合物。

信号放大与显色：通过链霉亲和素-HRP标记物催化底物TMB显色，颜色深浅与样本中Chemerin浓度正相关。

检测：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），根据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

（以96孔配置为例）

预包被微孔板：1块（96孔）

标准品：冻干粉2瓶（浓度范围：15.6–2,000 pg/mL，临用前需用稀释液重构并梯度稀释）

样本稀释液：1瓶（5 mL）

检测抗体：生物素化抗人Chemerin抗体（1瓶，0.6 mL）

酶结合物：HRP标记链霉亲和素（1瓶，0.6 mL）

TMB底物溶液：1瓶（10 mL）

终止液：1 M硫酸（1瓶，10 mL）

洗涤缓冲液（20×浓缩）：1瓶（50 mL，需稀释后使用）

操作步骤

标准品与样本准备：将标准品复溶并稀释至系列浓度，样本按1:5稀释（具体需优化）。

加样与孵育：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后拍干，每孔加满洗涤液，重复5次。

检测抗体孵育：每孔加入100 μL生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

酶结合物反应：洗涤后加入100 μL HRP标记物，37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光显色15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

试剂盒需2–8℃保存，复溶后标准品需分装冻存（-20℃），避免反复冻融。

样本避免溶血或脂血，建议复测以确保重复性。

操作时需佩戴防护用具，终止液为强酸需谨慎处理。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合（4PL）计算样本浓度。

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