产品概述

本试剂盒采用固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）原理，专用于定量检测大鼠血清、血浆、尿液、组织匀浆等样本中的AQP-5浓度。试剂盒具有高灵敏度（最低检测浓度可达1.0 pg/mL）、特异性强（不与其它细胞因子交叉反应）及重复性优异（板内/板间变异系数<10%）的特点。

检测原理

夹心法ELISA：预包被抗体捕获样本中的AQP-5，生物素标记的二抗与目标蛋白结合，再通过链霉亲和素-HRP复合物催化底物显色。

信号检测：显色强度与AQP-5浓度呈正比，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组分

微孔板：预包被抗AQP-5抗体（96孔或48孔配置可选）。

标准品：400 ng/mL冻干粉（复溶后梯度稀释）。

检测抗体：生物素标记抗AQP-5抗体。

酶结合物：链霉亲和素-HRP复合物。

显色底物：TMB溶液（A/B液）。

终止液：2M硫酸溶液。

洗涤缓冲液：20×浓缩液（需稀释）。

技术参数

检测范围：25–1000 pg/mL（线性相关系数R≥0.990）。

灵敏度：≤1.0 pg/mL。

保存条件：2–8℃避光保存，有效期6个月。

操作步骤

标准品稀释：将标准品按说明书梯度稀释。

加样与孵育：每孔加入样本或标准品，37℃孵育1小时。

洗涤：使用洗涤缓冲液洗板5次。

二抗孵育：加入生物素化抗体，37℃孵育30分钟。

酶结合物反应：加入HRP标记链霉亲和素，避光孵育15分钟。

显色与终止：加入TMB底物，避光反应10–15分钟后终止。

检测：450 nm波长读取OD值，绘制标准曲线并计算浓度。

注意事项

避免反复冻融样本，建议分装保存。

实验前需平衡所有组分至室温（20–25℃）。

终止液为强酸，操作时需佩戴防护用具。

应用范围

适用于体液（胸腹水、脑脊液）、细胞培养上清及组织匀浆中AQP-5的定量分析，广泛应用于生理病理研究、药物开发等领域。

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