实验原理

试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。预包被抗大鼠MBP抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色，酸化后变为黄色，其吸光度（OD值）与样本中MBP浓度呈正相关，通过450nm波长测定OD值并计算含量。

检测方法：双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等

用途：科研实验专用，不适用于临床诊断。

性能参数

灵敏度：高（检测下限通常为pg/mL级）

特异性：仅识别大鼠MBP，无交叉反应

重复性：批内与批间变异系数均＜10%

检测时间：2-3小时

标准曲线范围：根据不同，通常覆盖1.56–100 ng/mL（具体以实际说明书为准）

样本处理要求

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清保存于-20℃（避免反复冻融）。

血浆：EDTA/肝素抗凝血，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），分离上清。

组织匀浆：

用预冷PBS（pH 7.4）冲洗组织，去除血液后称重剪碎。

按1:9（重量:体积）加入含蛋白酶抑制剂的PBS，冰上匀浆。

5000×g离心5-10分钟，取上清检测。

操作流程

试剂准备：平衡至室温（20分钟），取出所需板条，剩余密封保存于4℃。

加样：

标准品孔：加入梯度浓度标准品50μL。

样本孔：加入待测样本50μL。

空白孔：仅加缓冲液。

孵育与洗涤：37℃孵育后彻底洗涤。

显色与终止：加入TMB显色，终止液反应后测定OD450nm。

存储与运输

储存条件：2–8℃冷藏，避免冷冻。

保质期：6个月（生产日期及批号见外包装）。

运输：低温（2–8℃）配送。

注意事项

避免反复冻融样本或试剂。

实验前确保所有试剂及样本充分混匀。

不同批次试剂盒组分不可混用。

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