大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的BALP含量，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

实验原理

包被：微孔板预包被抗大鼠BALP抗体。

结合：加入样本或标准品后，BALP与固相抗体结合；洗涤后加入生物素化检测抗体形成复合物。

信号放大：加入HRP标记链霉亲和素，与生物素结合。

显色：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止液转为黄色，450 nm处测OD值，浓度与吸光度正相关。

试剂盒组成

预包被酶标板（96孔）

BALP标准品（冻干粉，临用前稀释）：浓度梯度为100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56 U/L，0 U/L为空白对照

样本稀释液、洗涤缓冲液（20×浓缩液）

TMB显色液、终止液

生物素化抗体、HRP标记亲和素

操作步骤

标准品配制：用稀释液复溶冻干标准品，静置10分钟混匀后梯度稀释。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后拍干，洗涤液洗板3次。

检测抗体孵育：加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟，再次洗涤。

酶结合物反应：加入HRP标记亲和素，37℃避光孵育30分钟，洗涤。

显色与终止：加入TMB显色15分钟，终止后30分钟内检测OD值。

注意事项

避免反复冻融标准品或样本。

不同批次试剂不可混用。

若样本浓度过高，需用稀释液调整至检测范围内。
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