产品概述

本试剂盒采用固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）原理，专用于定量检测大鼠血清、血浆或其他生物液体中的凝血因子Ⅹ（FⅩ）活性浓度。通过生物素-亲和素系统放大信号，确保检测的高灵敏度和特异性，灵敏度可达＜50pg/mL。

试剂盒组成

（2-8℃保存）

微孔酶标板：预包被抗大鼠FⅩ抗体（96T/48T规格可选）。

标准品：冻干粉或液体（400ng/mL），需按说明书稀释。

空白对照：即用型缓冲液。

生物素标记抗体：即用型，特异性结合大鼠FⅩ。

链霉亲和素-HRP结合物：即用型。

洗涤缓冲液（20×浓缩液）：使用前需稀释。

底物A/B：避光保存，显色反应终止后需立即检测。

终止液：2M硫酸溶液。

封板膜：一次性使用，防止交叉污染。

实验步骤

样本准备：血清/血浆需离心去除颗粒物，避免反复冻融。

标准品稀释：梯度稀释至7个浓度点，建立标准曲线。

加样与孵育：

每孔加入标准品或样本（50μL），随后加入生物素标记抗体（50μL），37℃孵育60分钟。

洗涤5次后，加入HRP结合物（100μL），37℃孵育30分钟。

显色与终止：

加入底物A/B（各50μL），避光反应15分钟。

加入终止液（50μL），450nm波长读取OD值。

注意事项

试剂平衡：从冷藏取出后需室温平衡15-30分钟，避免冷凝水影响浓度。

操作规范：

加样时间控制在5分钟内，高浓度样本需预稀释（计算时乘以稀释倍数）。

每批次实验需同步制作标准曲线，建议复孔检测。

保存条件：未使用的板条需密封保存；底物避光；不同批号组分禁止混用。

废弃物处理：所有接触样本的耗材按生物危害废物处置。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标，拟合四参数逻辑曲线，通过样本OD值反推浓度。

技术参数

检测范围：15.6-1000pg/mL。

特异性：与大鼠其他凝血因子无交叉反应。

精密度：板内变异系数＜10%，板间变异系数＜15%。

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