细胞简介

大鼠毛囊细胞分离自皮肤毛囊组织；毛囊是表皮细胞连续形成的袋样上皮。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头，中心是一根毛发，立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上，附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈，毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中，毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度，它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成，除了具有结缔组织和血管的真皮乳头（毛乳头）外，毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。毛囊开口起始于皮肤表面，而每个毛囊又和一个或多个腺胞相连。每个腺胞解离成富含脂质的物质，却又通过一个共同和毛囊相通连的皮脂腺导管将分泌物运送到皮肤表面排出。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠毛囊细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠毛囊细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞质量检测

活率检测：采用台盼蓝染色法，活细胞拒染，死细胞被染成蓝色，活率应≥90%。

纯度鉴定：通过免疫荧光染色、流式细胞术等方法，检测细胞特异性标志物，确保细胞纯度≥95%。

生物学功能检测：根据细胞类型进行相应功能检测，如肝细胞的白蛋白分泌功能、免疫细胞的增殖与杀伤功能等。

培养条件与培养基配置

推荐使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基（或MEM培养基），添加青霉素-链霉素双抗。培养条件为37℃、5% CO₂及70%-80%湿度环境，气相成分为95%空气和5%二氧化碳。冻存液需现配现用（90%血清+10%DMSO），液氮保存。细胞传代周期为2-3天，消化时采用0.25%胰蛋白酶-EDTA，传代比例建议1:2至1:5。

细胞处理操作规范

复苏：将冻存管37℃水浴快速解冻，离心后弃上清，用培养基重悬并接种至培养瓶，次日换液；

传代：80%-90%融合度时消化，离心后按比例分瓶；

冻存：生长状态良好时收集细胞，冻存密度不低于1×10⁶/ml。运输可选择冻存管干冰运输或T25培养瓶常温运输，后者需观察贴壁率并及时传代。

质量控制与应用领域

细胞需通过形态学（梭形贴壁生长）和标志物（波形蛋白阳性）双重验证，提供配套鉴定报告。在研究中可用于：

体外药物模型评估（如COPD模型中结缔组织生长因子CTGF的高表达分析）；

基因功能调控（特定基因敲除或过表达实验）；

分子机制研究（如RNA剪接、Western Blot等）。注意仅限科研用途，禁止临床应用。
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