细胞简介

大鼠脑动脉血管平滑肌细胞分离自脑动脉组织；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉；各级静脉都没有瓣膜。它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脑动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠脑动脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态**

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

培养基与环境

推荐培养基：含FBS（胎牛血清）、内皮细胞生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基，如89% 1640培养基+10% FBS+1%双抗 。

培养条件：气相为空气95%、CO₂ 5%，温度37℃ 。

包被要求：培养瓶需经PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）包被 。

收货处理步骤

1. 消毒与观察 75%酒精喷洒培养瓶表面消毒，显微镜下观察细胞状态及有无污染，拍照记录 。

2. 平衡环境 放入37℃培养箱平衡2-3小时，使细胞适应温度和CO₂浓度 。

3. 培养基处理 若细胞密度＜80%，直接补加5-6ml培养基继续培养；若＞80%，可消化传代 。

4. 传代方法 1:2~1:4比例传代，2-3天换液一次，使用0.25%胰蛋白酶消化 。

传代与冻存

传代特性：原代细胞体外培养周期有限，通常可传2-3代（部分方法显示可传18代以上，需以具体产品说明为准） 。

冻存液：推荐含 DMSO 的血清冻存液（如90% FBS+10% DMSO），程序降温后保存于液氮。

注意事项

质量控制：细胞传代比例建议1:2至1:3，避免过度消化。

污染预防：严格无菌操作，定期检测支原体。

代次限制：原代细胞建议使用前5代，以保持功能稳定性。
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