人睾酮(T)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液等样本中的睾酮（T）含量。检测灵敏度高，特异性强，适用于科研用途，不可用于临床诊断。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被抗睾酮抗体。

反应步骤：依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB，在过氧化物酶催化下显蓝色，酸性终止液转化为黄色，颜色深度与样本中睾酮浓度正相关。

定量分析：于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

样本稀释液

洗涤缓冲液（含0.05%吐温20的PBS）

TMB显色底物

终止液（酸性溶液）

阴性/阳性对照品

样本处理与保存

血清：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心（1000×g，15分钟），取上清保存（同血清）。

组织匀浆/细胞上清：离心去除杂质后分装冻存。

操作步骤

加样：每孔加入标准品或样本50 μL，随后加入HRP标记抗体50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，静置30秒，重复5次。

显色：每孔加TMB底物100 μL，避光反应15分钟。

终止：加终止液50 μL，15分钟内测定OD值。

注意事项

实验前需平衡试剂至室温（20-25℃）。

避免交叉污染，使用一次性吸头。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

过期或变质试剂不得使用。
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