人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒

产品简介

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或细胞培养上清中的高密度脂蛋白（HDL）浓度。适用于心血管疾病风险评估、脂代谢研究及临床诊断。

检测原理

包被：微孔板预包被抗人HDL单克隆抗体。

结合：样本中的HDL与包被抗体结合。

标记：加入HRP标记的二抗，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。

显色：TMB底物显色，颜色深浅与HDL浓度成正比。

试剂盒组成

| 组分 | 96T规格 | 保存条件 |

| 预包被微孔板 | 1块（12×8孔）| 2-8℃（干燥） |

| HDL标准品（50μg/mL）| 6管 | -20℃（避免冻融）|

| HRP标记二抗 | 1瓶（12mL） | 2-8℃ |

| TMB显色液 | 1瓶（10mL） | 避光2-8℃ |

| 终止液（2M H₂SO₄） | 1瓶（10mL） | 室温 |

| 洗涤缓冲液（20×） | 1瓶（50mL） | 2-8℃（稀释后4℃保存）|

样本要求

血清/血浆：采集后离心去除颗粒，-20℃保存，避免反复冻融。

细胞上清：离心去除沉淀，立即检测或-80℃保存。

避免溶血、脂血或污染。

操作步骤

标准品稀释：用标准品稀释液配制0、5、10、20、40、80 μg/mL梯度。

加样：每孔加入50μL标准品或样本，37℃孵育30分钟。

洗涤：甩干孔内液体，用洗涤液洗板5次。

加二抗：每孔加50μL HRP标记二抗，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB显色液50μL/孔，避光反应15分钟。

终止：加入50μL终止液，450nm波长测OD值。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

根据样本OD值，从曲线方程计算HDL浓度（μg/mL）。

性能参数

检测范围：1.56-100 μg/mL

灵敏度：0.5 μg/mL

批内变异：CV < 8%

批间变异：CV < 10%

回收率：85-115%

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免反复冻融标准品。

不同批次试剂不可混用。

终止液为强酸，避免接触皮肤。

本试剂盒仅用于科研，临床诊断需进一步验证。
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