人甘露糖(MN)ELISA试剂盒

试剂盒组成及配制

酶联板：96孔或48孔预包被板条（需密封保存于4℃）。

标准品：冻干品2瓶，使用前需用标准品稀释液复溶。

样本稀释液：1×20mL/瓶，用于稀释高浓度样本。

检测抗体：生物素标记抗体（120μL/瓶，按1:100稀释）及对应稀释液。

酶结合物：辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素（120μL/瓶，按1:100稀释）及对应稀释液。

底物溶液（TMB）：10mL/瓶，避光保存。

终止液：2N硫酸溶液（10mL/瓶）。

洗涤液：20×浓缩液（使用前按1:25稀释为工作液）。

操作步骤

平衡与准备：试剂盒从4℃取出后室温平衡20分钟，酶联板开封后未用完板条需密封保存。

加样：

标准品孔：加入梯度浓度标准品50μL。

样本孔：先加待测样本10μL，再加稀释液40μL（总稀释倍数根据样本浓度调整）。

空白孔：仅加稀释液。

孵育：每孔加入HRP标记检测抗体100μL，封板后37℃孵育60分钟。

洗涤：弃去液体，用洗涤液注满每孔，静置1分钟后甩干，重复5次。

显色：每孔加底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

终止与检测：每孔加终止液50μL，15分钟内于450nm波长读取OD值。

性能参数

准确性：标准曲线相关系数R²≥0.990。

灵敏度：最低检测限<0.1ng/mL。

特异性：不与结构类似物交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数（CV）均<15%。

注意事项

避免反复冻融试剂，稀释时若有结晶可37℃水浴助溶。

加样需精准控制时间（建议5分钟内完成），推荐使用多通道移液器。

高浓度样本需预稀释，计算结果时乘以稀释倍数。

储存与有效期

储存条件：2-8℃避光保存。

有效期：6个月（详见外包装标签）。
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