人补体片段3b受体(C3bR)ELISA试剂盒

实验原理

采用双抗体夹心法：

包被：微孔板预包被抗人C3bR单克隆抗体。

结合：样本中的C3bR与固相抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体形成复合物。

显色：加入HRP标记的链霉亲和素及TMB底物，在酶催化下产生颜色反应，颜色深度与C3bR浓度正相关。

检测：450nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。

用途：定量检测人血清、血浆或相关液体样本中C3bR的浓度，适用于科研用途。

试剂盒组成

预包被微孔板（96孔/48孔）

C3bR标准品（6-8浓度梯度）

生物素标记抗体

HRP标记链霉亲和素

显色剂（TMB A/B液）

终止液（2M硫酸）

浓缩洗涤液（20×）

样本稀释液

封板膜、说明书

样本要求

血清/血浆：离心去除颗粒，避免反复冻融。

组织匀浆：按重量体积比（如1:9）用PBS匀浆后离心取上清。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：标准品/样本各100μL加入微孔，37℃孵育90分钟。

洗涤：洗板5次，拍干。

加检测抗体：每孔加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：加入HRP标记物，37℃孵育30分钟。

显色：每孔加TMB 100μL，避光反应15分钟。

终止：加终止液50μL，15分钟内测定OD值。

注意事项

不同批次试剂不可混用。

终止液为强酸，避免接触皮肤。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

技术参数

检测范围：0.156-10 ng/mL（具体以实际标准曲线为准）

灵敏度：<0.05 ng/mL

精密度：板内/板间CV均<10%
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