产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或组织匀浆等生物样本中多功能蛋白聚糖（Versican, VS）的含量。试剂盒具有高特异性、灵敏度（检测限低至27 pg/mL）和稳定性（板内/板间变异系数<10%），适用于科研用途，不用于临床诊断。

实验原理

包被：微孔板预包被抗Versican抗体，形成固相载体。

结合：样本中的VS与固相抗体结合，随后加入生物素化检测抗体及HRP标记亲和素，形成复合物。

显色：TMB底物在过氧化物酶催化下显蓝色，终止液转化为黄色，其吸光度（450 nm）与VS浓度正相关。

试剂盒组成

96T规格：

预包被酶标板（1×96孔）

标准品（冻干粉，2瓶，100 ng/mL，需梯度稀释至1.56-100 ng/mL）

生物素化抗体、HRP标记亲和素、TMB显色液、终止液

样品稀释液、洗涤缓冲液（20×浓缩液）

封板膜、密封袋

保存条件：未开封组分2-8℃保存，有效期6-12个月。

样本要求

类型：血清（避免溶血）、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清（离心去除颗粒）、组织匀浆（PBS缓冲）。

储存：短期4℃保存，长期需分装-20℃以下冻存，避免反复冻融。

操作步骤

标准品制备：复溶后按1:2倍比稀释，共7个浓度点（100-1.56 ng/mL），零孔为样品稀释液。

加样：每孔加标准品或样本100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液300 μL/孔，重复5次。

检测抗体孵育：加生物素化抗体100 μL/孔，37℃60分钟。

酶结合物反应：加HRP-亲和素100 μL/孔，避光37℃30分钟。

显色与终止：加TMB 90 μL/孔，避光显色15分钟，加终止液50 μL。

读数：450 nm波长测定OD值，绘制标准曲线计算样本浓度。

注意事项

质量控制：建议每板设复孔及空白对照，标准曲线R²≥0.990。

干扰规避：避免样本脂血或细菌污染，高浓度样本需稀释后重测。

安全提示：终止液含强酸，需穿戴防护装备操作。

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