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人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 人白介素3ELISA试剂盒 Human Interleukin 3, IL-3 Elisa Kit 产品介绍
人白介素3(IL-3)ELISA试剂盒 预期用途
定量检测人血清、血浆或细胞培养上清等样本中的IL-3浓度,仅限科研使用,不可用于临床诊断。 检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将抗人IL-3单克隆抗体预包被于酶标板孔,加入待测样本或标准品后,IL-3与固相抗体结合;洗涤后加入生物素标记的检测抗体,形成抗体-抗原-抗体复合物;再通过HRP标记的链霉亲和素与TMB底物显色,颜色深度与样本中IL-3浓度呈正相关,450nm波长下测定吸光度(OD值)并计算浓度。 试剂盒组成
预包被酶标板:96孔(12孔×8条) 标准品(冻干粉):浓度范围通常为15.6-1000 pg/mL,需按说明书复溶 样本稀释液:3 mL 生物素标记抗体:1.5 mL HRP标记链霉亲和素:1.5 mL 洗涤缓冲液(20×):20 mL(使用前需稀释) TMB显色液:A液、B液各3 mL 终止液:3 mL(2M硫酸) 封板膜/密封袋:2张 操作步骤
样本准备:血清/血浆需离心去除颗粒物,细胞上清需过滤。 标准品稀释:按梯度稀释至工作浓度。 加样:每孔加入标准品或样本100 μL,37℃孵育90分钟。 洗涤:弃液后每孔加洗涤液300 μL,重复3次。 加检测抗体:每孔加入生物素化抗体100 μL,37℃孵育60分钟。 加酶结合物:每孔加入HRP标记物100 μL,37℃避光孵育30分钟。 显色:加入TMB底物100 μL,室温避光显色15分钟。 终止与检测:加终止液50 μL,立即于450nm测OD值。 注意事项
储存条件:未开封试剂盒-20℃保存(有效期6个月);开封后酶标板需密封防潮,2-8℃保存。 样本要求:避免反复冻融,溶血或脂血样本可能影响结果。 质量控制:建议标准品及样本做复孔检测,CV值应<15%。 交叉污染:使用一次性吸头,避免酶标板干燥。 结果计算 以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过四参数拟合方程计算样本浓度。若样本OD值超出标准曲线范围,需适当稀释后重测。
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上海谷研实业有限公司
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