人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或其他生物液体中阿拉伯半乳糖蛋白（AGPs）的含量。

实验原理

采用双抗体夹心法。将纯化的抗AGPs抗体包被于微孔板，形成固相抗体。加入样本或标准品后，AGPs与固相抗体结合，再加入生物素标记的抗AGPs抗体形成复合物。随后加入HRP标记的亲和素，经洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶催化下呈蓝色，酸化后转为黄色，其颜色深度与样本中AGPs浓度呈正相关。通过酶标仪测定450 nm波长下的吸光度（OD值），依据标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

AGPs标准品

生物素化抗体

HRP标记亲和素

浓缩洗涤液

TMB显色底物

终止液

封板膜

操作步骤

试剂准备：将试剂盒从2-8℃取出，室温平衡15-30分钟。浓缩洗涤液需用蒸馏水稀释，若有结晶可37℃水浴助溶。

加样：每孔依次加入标准品或样本（建议双复孔检测）、生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

洗涤：弃去液体，用洗涤液注满微孔，静置30秒后弃去，重复5次。

显色：加入TMB底物，避光孵育15分钟，后加入终止液。

检测：30分钟内于450 nm波长读取OD值。

注意事项

样本处理：

避免使用溶血、脂血或反复冻融样本。

新鲜样本需离心去除沉淀，分装保存于-20℃（避免反复冻融）。

试剂保存：

未开封试剂盒保存于2-8℃，有效期6个月；频繁使用时避免多次冻融。

开封后的微孔板需密封保存（含干燥剂）。

实验控制：

建议每批次实验均包含标准曲线及空白对照。

若显色过浅可适当延长底物孵育时间，但需统一条件。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

性能参数

灵敏度：≤0.1 ng/mL

检测范围：0.156-10 ng/mL

特异性：不与其他人源糖蛋白发生交叉反应。
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