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大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
包装与价格:
产品名称 大鼠主要碱性蛋白ELISA试剂盒 Rat major basic protein, MBP Elisa Kit 产品介绍
大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。以大鼠MBP特异性抗体包被酶标板,样本中的MBP与包被抗体结合后,加入生物素化检测抗体形成复合物,再通过辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素与底物显色。显色强度与样本中MBP浓度成正比,通过标准曲线定量。 适用范围 适用于大鼠血清、血浆、脑脊液、细胞培养上清及组织匀浆等液体样本的MBP检测。 试剂盒组成
预包被酶标板:96孔 标准品(冻干粉):200 ng/mL(需复溶后梯度稀释) 20×浓缩洗涤液:50 mL 样本稀释液:12 mL 酶标抗体工作液:12 mL 底物液(A/B):各6 mL 终止液:6 mL 封板膜、说明书及密封袋 自备器材 37℃恒温孵育箱 450 nm滤光片酶标仪 精密移液器及一次性吸头 蒸馏水或去离子水 计时器、吸水纸 操作步骤
试剂准备 所有试剂室温平衡30分钟,20×洗涤液按1:19稀释为工作浓度。 标准品复溶后依次稀释为200、100、50、25、12.5、6.25 ng/mL。 加样 标准品孔:加入50 μL梯度标准品。 样本孔:先加10 μL样本,再加40 μL稀释液(5倍稀释)。 空白孔:仅加样本稀释液。 孵育与洗涤 37℃孵育60分钟,洗板5次,拍干。 每孔加入酶标抗体50 μL,37℃孵育30分钟,再次洗板。 显色与终止 加入底物A/B各50 μL,避光反应15分钟。 终止液50 μL/孔,立即测定450 nm OD值。 注意事项
避免反复冻融样本,离心去除沉淀。 加样时间控制在10分钟内,推荐使用多道移液器。 孵育时需覆盖湿盒或封板膜防止蒸发。 标准曲线需每次实验重新制备。 计算与结果 以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,通过样本OD值计算浓度。若样本浓度超出范围,需进一步稀释后复测。 有效期与储存 未开封试剂盒有效期为12个月,开封后组分按说明书要求保存。
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上海谷研实业有限公司
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