产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液等样本中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的浓度，适用于科研领域。

实验原理

采用双抗体夹心法或间接法（根据试剂盒型号不同）：

双抗体夹心法：微孔板预包被抗人VEGF抗体，加入样本后形成抗原-抗体复合物，再与酶标记的二抗结合，经显色反应后通过吸光度（OD值）定量。

间接法：样本中的VEGF与固相抗体结合后，加入生物素化抗体及链霉亲和素-HRP，通过显色反应测定浓度。

显色底物为TMB，在450 nm波长下检测OD值，浓度与颜色深浅呈正相关。

试剂盒组成

| 组分 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存条件 |

| 酶标包被板 | 1×48孔 | 1×96孔 | 2–8℃ |

| 标准品（冻干粉） | 0.3 ml×6管 | 0.3 ml×6管 | 2–8℃ |

| 酶标试剂 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 | 2–8℃ |

| 显色剂A/B液 | 各3 ml×1瓶 | 各6 ml×1瓶 | 避光2–8℃ |

| 终止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2–8℃ |

| 20×浓缩洗涤液 | 15 ml×1瓶 | 25 ml×1瓶 | 2–8℃（稀释后使用） |

| 封板膜、密封袋 | 各2片/1个 | 各2片/1个 | 室温 |

注：标准品浓度梯度通常为0–40 mIU/L（具体以实际批次为准）。

样本处理要求

血清：室温静置10–20分钟凝固后，2000–3000 rpm离心20分钟，取上清；若沉淀需再次离心。

血浆：使用EDTA或柠檬酸钠抗凝，离心后取上清，避免反复冻融。

细胞上清液：离心去除颗粒物，分装保存于-20℃或-80℃。

操作注意事项

试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。

洗涤时需充分拍干微孔板，避免交叉污染。

显色时间需严格控制，终止反应后30分钟内完成检测。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过拟合方程计算样本浓度。

有效期与储存

未开封试剂盒保存于2–8℃，有效期12个月；开封后组分按标签要求保存。

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