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大鼠肺血管平滑肌细胞
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产品名称 Rat Pulmonary Vascular Smooth Muscle Cells 产品介绍
细胞简介 大鼠肺血管平滑肌细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺血管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺血管平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺血管平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，**研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。
方法简介： 公司实验室分离的大鼠肺血管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测： 公司实验室分离的大鼠肺血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 培养信息： 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态** 消化液 0.25%胰蛋白酶 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 培养关键参数 培养基 含FBS、生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基 培养条件 气相：空气95% + CO₂ 5%，温度37℃ 换液频率 每2-3天换液一次 传代特性 可传2-3代（不同来源显示2-3代或18代以上，可能因培养方法差异） 消化液 0.25%胰蛋白酶 包被条件 PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%） 细胞的制备流程 组织取材：从活体动物或新鲜手术标本中获取目标组织，取材过程需严格无菌操作，尽量缩短组织暴露时间 组织处理：通过机械剪切、酶消化（常用胰蛋白酶、胶原酶）等方式将组织分散成单细胞悬液 细胞分离：利用过滤、离心等方法去除细胞碎片和杂质，获得纯化的单细胞群体 接种培养：将细胞接种到含特定培养基的培养容器中，置于37℃、5%CO₂的培养箱中培养 关键操作要点 细胞复苏 快速解冻：37℃水浴中摇晃冻存管至完全融化 离心洗涤：1000 RPM离心4分钟，弃上清后用培养基重悬 培养维护 贴壁细胞：汇合度达80%-90%时传代，使用胰酶消化（如0.25% Trypsin-EDTA） 悬浮细胞：定期换液，避免密度过高导致营养耗尽 冻存保护 冻存液配方：推荐10% DMSO + 90% 完全培养基，现用现配 程序降温：-80℃冰箱过夜后转入液氮长期保存
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上海谷研实业有限公司
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