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流产嗜衣原体PCR试剂盒
包装:50次


产品名称
Chlamydophila abortus PCR Kit
产品介绍

产品及特点

流产衣原体(Chlamydophila abortus)是绵羊地方性流产的主要病原,能够引起感染母羊在妊娠期最后2周-3周内出现流产、产死羔或足月产下存活不超过 48h的虚弱羔羊。衣原体感染引起的妊娠晚期流产在世界许多养羊地区,特别是在临产期羊群密集的地区造成严重的经济损失。除绵羊外,流产衣原体感染山羊、牛、猪、马等家畜同样引起妊娠晚期流产。流产衣原体也能感染人,引起非典型肺炎和孕妇流产等,属于人兽共患病病原。本产品是根据 PCR原理开发的流产嗜衣原体检测试剂盒,它具有下列特点:

1、即开即用,用户只需要提供 DNA模板。

2、引物经过精心优化,专一性强,只扩流产嗜衣原体,与其他病原没有交叉反应。

3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次,但只能用于科研。

规格及成分

成份编号十孔盒包装
PCR  MagicMix 3.0908051 mL(红盖)
超纯水1009351 mL(亮黄色)
流产嗜衣原体 PCR引物混合液13-19310yw100 μL(白盖)
流产嗜衣原体 PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)60908-19310pc50  μL(黄盖)
使用手册13-19310sc1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA的制备1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

2、如果有 N个样品,则需要做 N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL流产嗜衣原体 PCR阳性对照的 10000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA放冰上待用。

二、设置 PCR反应(40μL体系)

3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:

成分

N+2个样品管PCR阴性对照PCR阳性对照
PCR  Magic Mix 3.0各 20  μL20  μL20  μL
流产嗜衣原体 PCR引物混合液各 2  μL2  μL2  μL
N+2个样品 DNA模板各 18  μL--
PCR阴性对照(水)-18  μL-
PCR阳性对照(流产嗜衣原体  PCR阳性对照的10000倍稀释液)--18  μL

4、按下表设置 PCR反应:

过程温度时间
预变性95℃5 min
PCR反应(35个循环)95℃30  sec
PCR反应(35个循环)55℃30  sec
PCR反应(35个循环)72℃30  sec
最后延伸72℃7 min

三、电泳检测

5、取 10-20 μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测  PCR产物。本产品提供的 PCR  Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。

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