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组织总磷含量检测试剂盒(微量法)
包装:100管/96样


产品介绍

磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率,进而为合理施肥提供依据。

总磷经消化后,转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,一定条件下,钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量,进而可计算出组织中总磷含量。

产品组成:

产品组成规格保存条件
试剂一液体20ml×1瓶4℃
试剂二液体7ml×1瓶4℃
试剂三粉剂×2瓶4℃
标准品液体1ml×1支4℃

溶液的配制:

1、试剂一:强腐蚀性,强氧化性;

2、试剂三:临用前配制,加入5ml蒸馏水,溶解后再加入2.5ml试剂二,混匀;

3、标准品:1mmol/L无机磷标准液。

技术指标:

最低检出限:0.0338mmol/L

线性范围:0.625-8mmol/L

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水和浓硫酸。

操作步骤(仅供参考):

一、有机磷提取(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

称取约0.1g组织于带盖试管中,加浓硫酸1ml,盖紧(封口膜封口,防止水分散失)后沸水浴10min左右,待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后,加试剂一200μL,充分混匀,盖紧后继续沸水浴,直到溶液呈透明状,取出室温冷却后,加蒸馏水3.8ml,充分混匀;室温,10000rpm,离心10min,取上清液,待测。

二、测定步骤

1.可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到660nm,蒸馏水调零。

2.打开水浴锅,调节温度到40℃

3.样本测定:

试剂名称(μL)空白管标准管测定管
标准液-10-
上清液--10
蒸馏水1009090
试剂三100100100

混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10min后于660nm测定吸光度,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。

三、组织无机磷含量计算

总磷含量(mmol/g质量)= [C标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)]×V总÷W=0.005×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷W

C标准液:1mmol/L;V总:上清液总体积,5ml=0.005 L;W:样本质量,g。

注意事项:

1.试剂三需临用前配制,限当天使用。

2.测定前先用1~2个样本做预实验,如吸光值大于1.5,需用蒸馏水做相应稀释

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