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总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
货号:S0101S
参考价格:778
包装:100次


产品名称
Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
总超氧化物歧化酶检测试剂盒(WST-8法)
产品介绍

       总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8)是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。
       超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
       目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
       目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的WST-8法,可以检测出低达0.5U/ml的超氧化物歧化酶。

检测原理:
        WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子(O2.-)反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),由于SOD能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,所以该反应步骤可以被SOD所抑制,因此SOD的活性与甲臜染料的生成量成负相关,从而通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。


基于黄嘌呤氧化酶偶联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。


产品特点:
       WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
      本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)相同,等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法,线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞,无需匀浆,操作更加便捷。
      本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。
      本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。本试剂盒S0101S包装共可以进行100次检测,S0101M包装共可以进行250次检测。

包装清单:

产品编号 产品名称  包装 
S0101S-1 SOD样品制备液 50ml
S0101S-2 SOD检测缓冲液 50ml
S0101S-3 WST-8 800μl
S0101S-4 酶溶液 100μl
S0101S-5 反应启动液(40X) 60μl
说明书 1份


保存条件:

-20℃保存,半年有效。S0101-3 WST-8需避光保存。

注意事项:

待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在**使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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