细胞简介

大鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统，在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈珠状，故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞（oligodendrocyte）是中枢神经系统（CNS）的成髓鞘神经胶质细胞，其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是，细胞发育是一个连续的过程，其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限，因此，其分类是相对的。这三型分别为：Ⅰ型少突胶质细胞又称前O2A（pre-O2A progenitor cell）。细胞呈圆形，表面光滑，直径约3μm，体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面，具有很强的分裂增殖潜力，表达神经节苷脂GM1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子（polysialic acid-neural cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起，极少数为单极突起，直径约7μm，有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞，既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质，故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell，O2A）。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达神经节苷脂GD3和GQ（淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体），故常用A2B5抗体标记O2A。Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力，为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力，又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出4～5条较粗大突起，表面还残留有A2B5标记物，同时也表达O1-O4抗原，无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网，大量表达半乳糖脑苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞（简称少突胶质细胞前体细胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突胶质细胞，前两者具有增殖能力。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶

质量检测：

公司实验室分离的大鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 双极、多极形

传代特性 不传代，不增殖，存活1-2周

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞质量检测

活率检测：采用台盼蓝染色法，活细胞拒染，死细胞被染成蓝色，活率应≥90%。

纯度鉴定：通过免疫荧光染色、流式细胞术等方法，检测细胞特异性标志物，确保细胞纯度≥95%。

生物学功能检测：根据细胞类型进行相应功能检测，如肝细胞的白蛋白分泌功能、免疫细胞的增殖与杀伤功能等。

培养条件与培养基配置

推荐使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基（或MEM培养基），添加青霉素-链霉素双抗。培养条件为37℃、5% CO₂及70%-80%湿度环境，气相成分为95%空气和5%二氧化碳。冻存液需现配现用（90%血清+10%DMSO），液氮保存。细胞传代周期为2-3天，消化时采用0.25%胰蛋白酶-EDTA，传代比例建议1:2至1:5。

细胞处理操作规范

复苏：将冻存管37℃水浴快速解冻，离心后弃上清，用培养基重悬并接种至培养瓶，次日换液；

传代：80%-90%融合度时消化，离心后按比例分瓶；

冻存：生长状态良好时收集细胞，冻存密度不低于1×10⁶/ml。运输可选择冻存管干冰运输或T25培养瓶常温运输，后者需观察贴壁率并及时传代。

质量控制与应用领域

细胞需通过形态学（梭形贴壁生长）和标志物（波形蛋白阳性）双重验证，提供配套鉴定报告。在研究中可用于：

体外药物模型评估（如COPD模型中结缔组织生长因子CTGF的高表达分析）；

基因功能调控（特定基因敲除或过表达实验）；

分子机制研究（如RNA剪接、Western Blot等）。注意仅限科研用途，禁止临床应用。
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