细胞简介

大鼠口腔粘膜成纤维细胞分离自口腔粘膜组织；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂与外界相通，后经咽峡与咽相续。口腔内有牙、舌等器官。口腔的前壁为唇、侧壁为颊、顶为腭、口腔底为黏膜和肌等结构。口腔借上、下牙弓分为前外侧部的口腔前庭（oral vestibule）和后内侧部的固有口腔（oral cavity proper）；当上、下颌牙咬合时，口腔前庭与固有口腔之间可借第三磨牙后方的间隙相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠口腔粘膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠口腔粘膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞培养技术

培养基配方：推荐使用含B-27 Supplement、EGF、bFGF等生长因子的专用培养基，添加青霉素和链霉素防止污染

培养条件：37℃、5% CO₂环境培养，气相成分为95%空气和5%二氧化碳

传代方法：80-90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟，按1:2比例传代

冻存保存：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后转入液氮长期保存

质量控制和检测

实验室分离的细胞需通过以下质量检测：

免疫荧光鉴定：Nestin标志物阳性率≥90%

无菌检测：确保不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌和真菌等污染物

细胞活性：复苏后存活率应≥80%

形态学检查：培养细胞应呈现典型神经前体细胞形态

产品规格和使用说明

产品规格：通常以5×10⁵cells/T25培养瓶形式提供

运输方式：可选择冻存管干冰运输或培养瓶常温运输

接收处理：

冻存细胞：立即复苏或转入液氮保存

培养瓶：静置2-4小时后换液

注意事项：

仅限科研用途

建议在收到细胞后3天内反馈状态

定期拍照记录细胞生长情况
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