细胞简介

人胸腺上皮细胞分离自胸腺组织；胸腺是机体重要的淋巴器官，其功能与免疫紧密相关，是T细胞分化、发育、成熟的场所，还可以分泌胸腺激素及激素类物质，具有内分泌技能的器官。胸腺上皮细胞和胸腺细胞是胸腺微环境的重要组成部分，其外，胸腺上皮细胞组成了胸腺细胞不同发育阶段的三维结构，根据其在胸腺中位置不同，可分为皮质胸腺上皮细胞和髓质胸腺上皮细胞。胸腺细胞的发育和成熟是通过在胸腺皮质和髓质上皮细胞的迁移过程中相互作用完成的。此外，胸腺细胞通过皮质胸腺上皮细胞介导的阳性选择和髓质胸腺上皮细胞介导的阴性选择发育为能够识别和耐受自身主要组织相容复合体和自身抗原的成熟T淋巴细胞。胸腺上皮细胞是构成胸腺微环境的主要成份，其形态、分布和功能多样。表面抗原表达具有高度异质性，与胸腺细胞结合成不同类型复合体，部分胸腺上皮细胞相互排列构成囊泡样结构。电镜观察，可把胸腺上皮细胞分为3-6型，用抗胸腺上皮细胞单克隆抗体荧光染色可把胸腺上皮细胞分为9种类型。

方法简介：

公司实验室分离的人胸腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人胸腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞质量检测

活率检测：采用台盼蓝染色法，活细胞拒染，死细胞被染成蓝色，活率应≥90%。

纯度鉴定：通过免疫荧光染色、流式细胞术等方法，检测细胞特异性标志物，确保细胞纯度≥95%。

生物学功能检测：根据细胞类型进行相应功能检测，如肝细胞的白蛋白分泌功能、免疫细胞的增殖与杀伤功能等。

培养条件与培养基配置

推荐使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基（或MEM培养基），添加青霉素-链霉素双抗。培养条件为37℃、5% CO₂及70%-80%湿度环境，气相成分为95%空气和5%二氧化碳。冻存液需现配现用（90%血清+10%DMSO），液氮保存。细胞传代周期为2-3天，消化时采用0.25%胰蛋白酶-EDTA，传代比例建议1:2至1:5。

细胞处理操作规范

复苏：将冻存管37℃水浴快速解冻，离心后弃上清，用培养基重悬并接种至培养瓶，次日换液；

传代：80%-90%融合度时消化，离心后按比例分瓶；

冻存：生长状态良好时收集细胞，冻存密度不低于1×10⁶/ml。运输可选择冻存管干冰运输或T25培养瓶常温运输，后者需观察贴壁率并及时传代。

质量控制与应用领域

细胞需通过形态学（梭形贴壁生长）和标志物（波形蛋白阳性）双重验证，提供配套鉴定报告。在研究中可用于：

体外药物模型评估（如COPD模型中结缔组织生长因子CTGF的高表达分析）；

基因功能调控（特定基因敲除或过表达实验）；

分子机制研究（如RNA剪接、Western Blot等）。注意仅限科研用途，禁止临床应用。
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