细胞简介

小鼠雪旺氏细胞分离神经组织；周围神经系统中的神经胶质细胞称施万（schwann，又名雪旺细胞）细胞，它沿神经元的突起分布。施万细胞包裹在神经纤维上，这种神经纤维叫有髓神经纤维。有髓神经纤维和无髓神经纤维的施万细胞的形态和功能有所差异，施万细胞的外表面有基膜，能分泌神经营养因子，促进受损的神经元的存活及其轴突的再生，参与周围神经系统中神经纤维的构成。施万细胞的胞核呈长卵圆形，其长轴与轴突平行，核周有少量胞质。由于施万细胞包在轴突的外面，故又称神经膜细胞（neurilemmalcell），它的外面包有一层基膜。施万细胞最外面的一层胞膜与基膜一起往往又称神经膜（neurilemma），光镜下可见此膜。在有髓神经纤维发生中，伴随轴突一起生长的施万细胞表面凹陷成一纵沟，轴突位于纵沟内，沟缘的胞膜相贴形成轴突系膜（mesaxon）。轴突系膜不断伸长并反复包卷轴突，把胞质挤至细胞的内、外边缘及两端（即靠近郎氏结处），从而形成许多同心圆的螺旋膜板层，即为髓鞘。故髓鞘乃成自施万细胞的胞膜，属施万细胞的一部分。施万细胞的胞质除见于细胞的外、内边缘和两端外，还见于髓鞘板层内的施－兰切迹。该切迹构成螺旋形的胞质通道，并与细胞外、内边缘的胞质相通。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠雪旺氏细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠雪旺氏细胞经S-100免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

操作流程

细胞接收处理：

稳定培养4小时后，根据细胞密度决定换液或传代。

若细胞悬浮或部分悬浮，需离心后重悬于含15%血清的培养基，继续培养2-3天观察贴壁情况。

传代操作（贴壁细胞示例）：

四步消化法（推荐用于难消化细胞）：

弃旧培养基，用新培养基轻柔洗涤1-2次去除死细胞。

加入少量培养基吹打，收集贴壁不牢的细胞。

加入0.3ml胰酶润洗后弃去，再加入1ml胰酶消化至细胞间隙明显。

立即终止消化，吹打后分瓶培养。

培养操作规范

细胞接收后需立即检查是否漏液，静置2-4小时稳定状态。复苏时需37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于新鲜培养基。传代建议在80-90%汇合度时进行，使用0.25%胰蛋白酶消化1-3分钟，以1:2至1:5比例分瓶。冻存需配制含10%DMSO的冻存液，采用程序降温后转入液氮保存。所有操作需严格无菌，建议在二级生物安全柜内完成。

质量检测与注意事项

细胞需确保不含有HIV-1、HBV、HCV等病原体及支原体污染。运输方式可选择干冰冻存（-80℃保存不超过1个月）或常温培养瓶运输。收到细胞后需3天内反馈异常情况，操作失误或非推荐培养体系导致的细胞问题不予重发。特别注意：该细胞仅限科研使用，禁止用于临床治疗。
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