细胞简介

人腹膜毛细血管内皮细胞分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞和间质（结缔组织、纤维、毛细血管、淋巴管）构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积最大、配布最复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜的主要生理功能：①分泌功能；②吸收功能；③再生能力；④防御功能；⑤调理功能。脏、壁腹膜都有丰富的毛细血管，毛细血管上有不同的孔径；腹膜的毛细血管和毛细血管后静脉是进行溶质交换的主要场所。

方法简介：

公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法结合化学试剂抑制法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

操作流程

细胞接收处理：

稳定培养4小时后，根据细胞密度决定换液或传代。

若细胞悬浮或部分悬浮，需离心后重悬于含15%血清的培养基，继续培养2-3天观察贴壁情况。

传代操作（贴壁细胞示例）：

四步消化法（推荐用于难消化细胞）：

弃旧培养基，用新培养基轻柔洗涤1-2次去除死细胞。

加入少量培养基吹打，收集贴壁不牢的细胞。

加入0.3ml胰酶润洗后弃去，再加入1ml胰酶消化至细胞间隙明显。

立即终止消化，吹打后分瓶培养。

培养操作规范

细胞接收后需立即检查是否漏液，静置2-4小时稳定状态。复苏时需37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于新鲜培养基。传代建议在80-90%汇合度时进行，使用0.25%胰蛋白酶消化1-3分钟，以1:2至1:5比例分瓶。冻存需配制含10%DMSO的冻存液，采用程序降温后转入液氮保存。所有操作需严格无菌，建议在二级生物安全柜内完成。

质量检测与注意事项

细胞需确保不含有HIV-1、HBV、HCV等病原体及支原体污染。运输方式可选择干冰冻存（-80℃保存不超过1个月）或常温培养瓶运输。收到细胞后需3天内反馈异常情况，操作失误或非推荐培养体系导致的细胞问题不予重发。特别注意：该细胞仅限科研使用，禁止用于临床治疗。
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