细胞简介

人尿道上皮细胞分离自尿道管组织；尿道是从膀胱通向体外的管道。尿道上皮细胞主要功能：①尿道上皮细胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多种功能特殊类型的细胞组成；②上皮细胞组成膀胱的防御系统与病原体接触，它们具有多种防御机制来阻止病原体粘着，保持泌尿器溶解物的不渗透性；③膀胱上皮细胞表达雌激素α、β受体，上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体，在损伤和感染时，这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用；④能释放许多细胞因子、免疫系统介质。

方法简介：

公司实验室分离的人尿道上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人尿道上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

培养条件

换液频率：每2-3天更换一次培养基。

传代比例：1:2至1:3（建议细胞融合度达80%-90%时传代）。

消化液：0.25%胰蛋白酶（含EDTA）。

传代周期：可传3-8代。

细胞分离与制备

分离方法：

中性蛋白酶-胶原酶联合消化法或胰蛋白酶-胶原酶混合消化法（EnkiLife）。

质量控制：

原代细胞来源于新鲜组织，采集过程符合伦理规范，并通过α-SMA免疫荧光验证表型。

培养与传代操作

传代步骤：

吸弃旧培养液，用PBS轻柔冲洗。

加入适量胰蛋白酶消化，显微镜下观察细胞回缩后终止消化。

离心重悬，按比例接种至新培养瓶。

注意事项：

培养基冻融后可能出现少量絮状物，不影响使用。

操作时避免污染，接触培养液后需立即冲洗。
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