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大鼠视网膜前体细胞
包装与价格:
产品名称 Rat Retinal Precursor Cells 产品介绍
产品属性
产品信息
细胞简介:大鼠视网膜前体细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。**神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。**层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。 方法简介:实验室分离的大鼠视网膜前体细胞采用胰蛋白酶消化法结合专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测:实验室分离的大鼠视网膜前体细胞经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 培养信息:包被条件 培养基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 换液频率:每2-3天换液一次 生长特性:半贴壁半悬浮 细胞形态:圆形 传代特性:可传1-2代 消化液:0.25%胰蛋白酶大鼠视网膜前体细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的**培养状态。
培养基 含FBS、生长添加剂、青霉素/链霉素的专用内皮细胞培养基 培养条件 气相:空气95% + CO₂ 5%,温度37℃ 换液频率 每2-3天换液一次 传代特性 可传2-3代(不同来源显示2-3代或18代以上,可能因培养方法差异) 消化液 0.25%胰蛋白酶 包被条件 PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%) 细胞的制备流程
组织取材:从活体动物或新鲜手术标本中获取目标组织,取材过程需严格无菌操作,尽量缩短组织暴露时间 组织处理:通过机械剪切、酶消化(常用胰蛋白酶、胶原酶)等方式将组织分散成单细胞悬液 细胞分离:利用过滤、离心等方法去除细胞碎片和杂质,获得纯化的单细胞群体 接种培养:将细胞接种到含特定培养基的培养容器中,置于37℃、5%CO₂的培养箱中培养 关键操作要点
细胞复苏 快速解冻:37℃水浴中摇晃冻存管至完全融化 离心洗涤:1000 RPM离心4分钟,弃上清后用培养基重悬 培养维护 贴壁细胞:汇合度达80%-90%时传代,使用胰酶消化(如0.25% Trypsin-EDTA) 悬浮细胞:定期换液,避免密度过高导致营养耗尽 冻存保护 冻存液配方:推荐10% DMSO + 90% 完全培养基,现用现配 程序降温:-80℃冰箱过夜后转入液氮长期保存 公司正在出售的产品
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