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探针法人型支原体实时定量PCR试剂盒
货号:Mqt-hom-20
品牌:炎熙生物
参考价格:1280
包装:20次反应
交货期:现货
产地:上海


产品名称
人型支原体检测试剂盒
人型支原体定量PCR试剂盒
产品介绍

探针法人型支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Hominis

 

货号:Mqt-hom-20      规格:20个反应

货号:Mqt-hom-50      规格:50个反应

货号:Mqt-hom-100     规格:100个反应

储存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点:

1,  特异性检测人型支原体,与其他生物基因组没有交叉反应。

2,  灵敏度高,最低检测极限为每反应7个拷贝。

3,  使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点;采用热启动方式,可抑制非特异性扩增,降低背景荧光。

4,  带有阳性对照样品(组分C),可用于检验试剂盒有效性。

5,  带有UDG酶和dUTP,可降低残留DNA的污染。

 

试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探针、阳性对照品、ROX染料,和用以防止残余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用户只需准备好DNA样品即可使用。

dUTP可以确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶。UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基,从而阻止含有尿嘧啶的DNA作为下几轮PCR的模板。在PCR循环开始前的UDG孵育步骤,可以破坏带有尿嘧啶的PCR产物。经过该步骤后,UDG在正常的PCR循环过程中被高温灭活,对PCR反应没有影响。UDG和dUTP可以阻止前次步骤残余DNA的扩增。

试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌(Thermus thermophilus),经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。热启动可减少残余DNA的污染,提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。通过结合特异性单克隆抗体,在室温下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循环的热变性阶段,抗体受热被去除,此时DNA聚合酶活性恢复,因此获得“热启动”功能。

人型支原体(Mycoplasma Hominis)是一种多形性革兰氏阴性菌,可呈球形、丝状和不规则形状,最小直径约80至100纳米,最大直径约0.5至1微米,平均直径约0.2至0.3微米,是一种人类常见的条件性支原体,可发现于人类和灵长类动物。人型支原体可作为共生菌生活在泌尿生殖道,在呼吸道也可发现其存在。它在宿主中营寄生和腐生生活,能引起多种感染,如:盆腔-炎症,流产后发热,产后发热,免疫抑制人群的外生殖器感染,以及新生儿的脑膜炎、肺炎和脓肿等。人型支原体有三种能量产生途径,包括糖酵解、精氨酸水解和核黄素代谢。

体外培养法是传统的人型支原体检测方法,但这个方法相对较慢,需2-5天时间,灵敏度较低,容易受到其他微生物的污染,有时需要繁琐的显微观察。这些缺点往往造成严重的时间浪费。而PCR法用于检测人型支原体,则有更高的灵敏度和更好的特异性,不受其他微生物污染的影响,且检测时间短,仅需几个小时即可获得结果。定量PCR法与常规PCR法相比,不仅可以精确定量,而且操作更为方便,更少受环境污染的影响。

试剂盒选择高度保守的膜蛋白移位酶基因作为靶点,可以特异性识别人型支原体,经BLAST验证,与其他生物基因组没有交叉反应。检测13种支原体和31种细菌,无特异性反应。在153个泌尿生殖道样品中,检测出108个人型支原体阳性,而培养法第×次检测出98个阳性,用冻存样本重复检测后证实另10个也为阳性,可见本试剂盒灵敏度高于培养法。以gap基因和16S rRNA基因为靶点的PCR方法,由于这两个基因在靶点区域有一些小的突变,导致一些菌株不能识别或灵敏度降低,而本试剂盒的靶点区域,经数十个菌株的测序证实不包含突变。本试剂盒适用于人型支原体的检测和鉴定。

 


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